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【Mirus新品推荐】TransIT®-Lenti Transfection Reagent——重组慢病毒生产的理想选择

2021-04-30
浏览次数: 93

Mirus公司新推出转染试剂TransIT®-Lenti Transfection Reagent,该产品适用于将载体转染至贴壁的HEK 293T细胞中,可提高转染效率,增加重组慢病毒产量。


产品特点:

高性能——高达八倍的功能性滴度

操作简便——无需更换培养液基 

无动物源性成分——安全可靠

 

产品信息


TransIT®-Lenti Transfection Reagent

产品货号

产品规格

供应商

MIR 6603

1 × 0.3 ml

Mirusbio

MIR 6604

1 × 0.75 ml

Mirusbio

MIR 6600

1 × 1.5 ml

Mirusbio

MIR 6605

5 × 1.5 ml

Mirusbio

MIR 6606

10 × 1.5 ml

Mirusbio


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产品信息


TransduceIT™ Transduction Reagent

产品货号

产品规格

供应商

MIR 6620

1 ml

Mirusbio

 

 【Mirus新品推荐】TransIT®-Lenti Transfection Reagent——重组慢病毒生产的理想选择


1. TransIT-Lenti转染试剂具有高功能性滴度.分别使用TransIT-Lenti (3:1, vol:wt), Lipofectamine® 2000 (3:1), Lipofectamine® 3000 (3:1:1), 25 kDa PEI (6:1), CaPO4 precipitation (4 µg pDNA/well)五种试剂将MISSION®载体(pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP™载体和慢病毒包装试剂)转染至贴壁293T/17细胞中。收集上清液,过滤(0.45 µm),用293T/17细胞滴定。慢病毒转导实验使用了TransduceIT™8 µg/ml),转导72h后使用guava easyCyte™ 5HT流式细胞仪检测GFP表达情况。功能性滴度根据病毒的稀释液与20% GFP阳性细胞进行计算。

 

 【Mirus新品推荐】TransIT®-Lenti Transfection Reagent——重组慢病毒生产的理想选择


2. 使用TransIT-Lenti实现高效转染. 使用TransIT®-Lenti转染试剂 (3:1, vol:wt)MISSION®载体(pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP™载体和慢病毒包装试剂)转染至贴壁293T/17细胞中。转染48h检测GFP效率图片于转染48h后拍自荧光显微镜。镜下细胞变圆和细胞融合是由于假型化重组慢病毒VSV-G 蛋白的高表达

 

 【Mirus新品推荐】TransIT®-Lenti Transfection Reagent——重组慢病毒生产的理想选择


 

重组慢病毒颗粒和靶细胞感染概述


(1) 将包括编码目的基因、水泡性口炎G蛋白(VSV-G)和必需的病毒蛋白(例如gagpolrev)的3-4种质粒转染至生产细胞(例如293T)中。

(2) 病毒从生产细胞浆膜出芽的方式组装及释放到上清液中,并以VSV-G的囊膜蛋白包裹。将含有病毒的培养液用0.45微米的滤器进行过滤以除去细胞。

(3) 重组病毒颗粒转导靶细胞常用阳离子聚合物来增加聚合和摄取。病毒进入细胞后脱衣壳,将RNA基因组和病毒的酶暴露出来。病毒RNA被逆转录成DNA,然后整合到宿主基因组中。

(4) 转录和翻译后由细胞产生目的基因所编码的蛋白质。

 

更多详情请联系Mirus中国授权代理商一一欣博盛生物

 

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