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StressMarq——Alpha 突触核蛋白产品推荐(2)

2024-03-04
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StressMarq——Alpha 突触核蛋白产品推荐(2)


1型 PFFs 诱发iPSC-衍生神经元中的pSer129 病理现象

超声处理的 1 型 α-突触核蛋白原纤维 (目录号 SPR-322) 诱导 iPSC 衍生神经元中α-突触核蛋白丝氨酸 129 的磷酸化,这是在 PD 中观察到的典型修饰。

孵育7天后进行p-Ser129染色,1型原纤维 (目录号 SPR-322) 7天内诱发iPSC-衍生神经元中磷酸化丝氨酸129 病理现象:

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A) 阴性对照孔(未添加原纤维). B) 加入目录号 SPR-322 原纤维的孔

来源: Cellstate Biosciences


1型 PFFs 诱发大鼠多巴胺能神经元中的蛋白聚集和毒性

N27 大鼠多巴胺能神经元用 1 型小鼠 PFF(目录号 SPR-324)以 1 µg/ml 处理。Ubc9 过表达诱导高水平的类泛素化修饰

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PFF 产生 α-突触核蛋白聚集(由硫磺素 T 测定)并降低细胞活力(MTT 测定)、诱导细胞毒性(LDH 测定)并增加 ROS 水平(CellROX)

研究学者使用StressMarq的小鼠 PFFs (目录号 SPR-324) 显示 α-突触核蛋白类泛素化修饰可能有神经保护功能

来源: Verma et al., https://doi.org/10.1523/ENEURO.0134-20.2020  


1型小鼠PFFs 诱发原代多巴胺能神经元中的Alpha突触核蛋白聚集

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研究人员使用 StressMarq 的小鼠 PFF(目录号 SPR-324)来证明特定的 CBP/p300 抑制剂可以减弱alpha 突触核蛋白聚集

来源:Hlushchuk et al. https://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/acschemneuro.1c00215



1型 PFFs 诱发大鼠脑中的 pSer129 病理现象

StressMarq 的小鼠 α 突触核蛋白 PFF(目录号 SPR-324)可在30天内诱发从注射部位扩散的病理学

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将 16 µg 小鼠 α-syn 1 型原纤维(目录号 SPR-324)注射到 Sprague-Dawley 大鼠纹状体一侧的两个位点。30 天后,提取大脑并进行 pSer129 固定和染色。在皮层的同侧(顶部)和对侧(底部)部分可以看到 PD 样病理的扩散。

注: performed by Atuka Inc., Toronto


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PFFs(目录号 SPR-324)两位点双边纹状体内注射至大鼠大脑,图像显示纹状体

来源: performed by Atuka Inc., Toronto


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将 PFF(目录号 SPR-324)通过两个位点双边纹状体注射至大鼠大脑,图像显示扣带皮层

来源: performed by Atuka Inc., Toronto


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将PFF(目录号 SPR-324)从两位点双边纹状体内注射大鼠大脑后,纹状体中多巴胺和多巴胺代谢物的水平

来源: performed by Atuka Inc., Toronto


1型 PFFs 诱发小鼠脑中的 pSer129 病理现象
8 周大的C57/BL6 小鼠注射了超声处理的重组小鼠alpha突触核蛋白单体(目录号 SPR-323)或PFFs (目录号 SPR-324)。小鼠背侧纹状体单侧注射 (bregma AP + 0.2 mm,L +/- 2.0 mm, V - 3.0 mm) 并于注射30天后取脑切片。注射了PFF 的小鼠显示在注射位点对侧纹状体和皮质都有典型的PD pSer129 病理现象。
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(A) 1.25 uL 小鼠alpha 突触核蛋白单体 (SPR-323). (B) 2.5 uL 小鼠alpha 突触核蛋白单体 (SPR-323). (C) 2.5 ug alpha 突触核蛋白 PFFs (SPR-324). (D) 5 ug alpha 突触核蛋白 PFFs (SPR-324). 内嵌图: PBS (阴性对照)

(A) 对侧皮质. (B) 同侧皮质.

(C) 对侧纹状体. (D) 同侧纹状体. 

来源: Porsolt, France


1型 PFFs 诱发C57BL/6小鼠中的 pSer129 病理学

8-9 周大的C57BL/6 小鼠注射了 4 µg 超声处理的重组小鼠 alpha 突触核蛋白原纤维 (目录号 SPR-324)。

免疫组织学分析显示在小鼠大脑的不同区域检测到 pSer129 α 突触核蛋白病理学。

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来源: KU Leuven, Belgium


1型 PFFs 诱发57BL/6 小鼠中的神经炎症

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注射后4个月时检测 C57BL/6 小鼠大脑注射纹状体中的 GFAP+ 星形胶质细胞

来源: KU Leuven, Belgium


1型 PFF被SH-SY5Y 细胞吸收后在14天内转移到了神经元iPSC中
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Alpha 突触核蛋白 PFF 信号(目录号 SPR-322,红色)与 iPSC(洋红色)信号相关,表明来自 SH-SY5Y 细胞(绿色)的 PFF 已转移。

来源: Neuronal cultures and ICC performed by Cellstate Biosciences (USA)



2型单体用于脑脊液聚集检测

2 型单体(目录号 SPR-316)聚集检测可区分患病样品和正常样品。

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来源:RT-QuIC assay by Dr. Alison Green and Graham Fairfoul (Green Lab), University of Edinburgh, UK


2型 PFF 影响 SH-SY5Y 成神经细胞瘤细胞膜

美国加州州立大学的研究人员研究了2型α突触核蛋白PFFs(目录号SPR-317)暴露对SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞膜的影响。将不同浓度的α突触核蛋白PFFS添加到神经母细胞瘤细胞中48小时。 使用扫描离子电导显微镜对α 突触核蛋白 PFF 与细胞膜的相互作用进行表征。

● SICM 图像表明,随着原纤维浓度的增加,膜粗糙度显著增加。

● 48小时内,PFF继续在细胞膜上积累

● XTT 细胞活力和 LDH 细胞毒性测定表明 PFF 没有诱导大量细胞死亡

● Alpha 突触核蛋白 PFFs 影响细胞膜并破坏细胞功能

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PFF(目录号 SPR-317)处理 48 小时后 SH-SY5Y 细胞膜的代表性 SICM 图像。

来源: Feng et al. https://doi.org/10.1021/acschemneuro.2c00478



 

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