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LPS在不同模型的应用和诱导不同疾病模型的protocol

2023-12-04
浏览次数: 90

炎症作为机体免疫应答的重要机制之一,一直是生命科学研究的热点方向,LPS(脂多糖)由于易于控制,模型重现性好,影响易于识别和测量等优势,成为建立急性炎症模型的金标准试剂。


LPS由一个多糖区域组成,该区域由被称为脂质A的特定糖脂部分锚定在细菌外膜上。脂质A是一种与羟基脂肪酸相连的葡萄糖胺双糖,羟基脂肪酸进一步被非羟基脂肪酸取代。脂肪酸的数量是内毒素免疫原性的主要决定因素。最活跃的脂质A含有6个脂肪酰基,存在于大肠杆菌和沙门氏菌等致病菌中。含有4或5种脂肪酸的低酰化脂质A,诱导宿主防御反应明显减少,并能以剂量依赖的方式抑制六酰化脂多糖引发的强烈内毒素反应。





LPS作用机制原理图

 LPS在不同模型的应用和诱导不同疾病模型的protocol

-Cohen J. The immunopathogenesis of sepsis. Nature. 2002 Dec 19-26;420(6917):885-91. PMID: 12490963.



现总结LPS在不同模型的应用和

诱导不同疾病模型的protocol供研究者参考:




LPS诱导疾病模型

模型
产品
给药方式
PMID
小鼠急性肺损伤模型
LPS-EB (Standard)
气管内给药10 μg
35544597
应用:Reg1-MO抑制LPS诱导的急性肺部炎症。
LPS-EB Ultrapure
气管内给药200μg/kg BW
24007300
应用:NLRP3炎症小体是LPS/机械通气急性肺损伤低氧血症发生发展所必需的
LPS-EB Ultrapure
气管内给药200 μg/kg BW
32117318
应用:自噬通过下调LPS和机械通气诱导的急性肺损伤中的炎症小体活性和IL-1β来防止肺通透性增加和低氧血症。
小鼠炎症小体激活
LPS-EB Ultrapure
腹腔注射20 mg/kg BW
33017103
注:引自“Current Protocols in Immunology”,为非经典NLPR3炎症小体激活提供了详细的实验方案
小鼠脓毒症模型
LPS-EB  (Standard)
腹腔注射18mg/kg BW
31779628
应用:Poldip2 介导 LPS 诱导的脓毒症相关性脑病模型中的血脑屏障破坏。
LPS-EB Ultrapure
腹腔注射6mg/kg BW
30808756
LPS-EB VacciGradeTM
腹腔注射50mg/kg BW
应用:西方饮食调节小鼠免疫状态和对LPS引发的脓毒症的反应。
LPS-EB Ultrapure
腹腔注射5mg/kg BW
36586274
应用:潜在生物标志物TIFA通过调节细胞焦亡影响脓毒症诱导的急性肾损伤。
大鼠脓毒症模型
LPS-EP (Standard)
静脉给药2.5 μg/kg BW
26149990
应用:人参皂苷Rg1和Re通过与TLR4结合来对LPS诱导的脓毒症起预防作用。
大鼠牙周炎模型
LPS-PG (Standard)
牙龈内注射10 μg
30665148
应用: LPS-PG诱导的牙周炎模型的血清中Aβ肽水平升高。
小鼠牙周炎模型
LPS-PG  (Standard)
牙龈内注射0.5mg/kg BW
34342041
应用:Th17/Treg失衡调节牙周炎所致的认知功能障碍
小鼠脑炎模型
LPS-PG (Standard)
腹腔注射5mg/kg BW
36240654
应用:丙咪嗪可以抑制LPS-PG诱导的小胶质神经毒性。


备注:

LPS-EB Ultrapure (Cat. Code: tlrl-3pelps)  LPS-EB VacciGradeTM  (Cat. Code: vac-3pelps)(表中红色标记)是InvivoGen独家提供的产品。


不同疾病模型的protocol





*LPS诱导急性肺损伤(ALI)模型 PMID: 35544597  LPS-EB (Standard)

✍ 小鼠模型的建立:

1. 每只小鼠气管给药LPS(standard)10μg。

2. 在LPS处理前24h,给小鼠施用MO(包括Reg1-MOs组和control MO组)。

3.  LPS处理6h后,麻醉小鼠并采集样本。

✍ 小鼠模型的应用:

评价Reg1-MOs对LPS诱导的ARDS的体内治疗效果。


*“Two-hit” 模型(LPS和MV诱导的ALI模型) PMID: 24007300  LPS-EB Ultrapure

✍ 小鼠模型的建立:

1LPS-EB Ultrapure经气管给药,浓度为100 μg/ml,剂量为2 μl/g BW。

2. LPS处理90min后,将小鼠麻醉进行机械通气(MV)。小鼠经气管插管并通气共4小时。

3. MV结束后,对小鼠实施安乐死以收集样本。

✍ 小鼠模型的应用:

验证LPS和MV可导致IL-1β分泌和ALI发展的假设,该过程依赖于NLRP3炎性小体的激活。





*LPS诱导败血症模型 PMID: 30808756 LPS-EB Ultrapure  LPS-EB VacciGradeTM

✍ 小鼠模型的建立:

1. 脓毒症模型:腹腔注射LPS-EB Ultrapure 6 mg/kg BW。

2. 无菌(GF) 小鼠脓毒症模型:腹腔注射50 mg/kg BW的LPS-EB VacciGradeTM

✍ 小鼠模型的应用:

1. 脓毒症模型:探讨西方饮食(western diet ,WD)对脓毒症的影响。

2. GF小鼠脓毒症模型:测定WD依赖性脓毒症对菌群的依赖性。





*LPS诱导牙周炎模型 PMID: 30665148 LPS-PG (Standard)

✍ 小鼠模型的建立:

1. 双侧上颌第一、第二磨牙间的腭侧牙龈注射10 μl浓度为1mg /ml的 LPS-PG (Standard)

2. 注射后,每隔48小时再注射两次。

3. 诱导过程持续14 d,每侧共注射 LPS-PG (Standard)6次。

✍ 小鼠模型的应用:

测定牙周炎动物模型中β淀粉样蛋白(Aβ)肽的循环水平。




备注:

标记为红色的产品均来自InvivoGen。这些数据是基于InvivoGen品牌的高品质 LPS生成的,由于已知的TLR2交叉污染的影响或批次间内毒素水平的不准确评估,这些数据可能不适用于来自其他供应商的低质量LPS。



产品信息

产品

货号

规格

LPS-EB (Standard)

tlrl-eblps

5 mg

LPS-EB Ultrapure

tlrl-3pelps

5 x 10e6 EU

LPS-EB VacciGradeTM

vac-3pelps

5 x 10e6 EU

LPS-PG (Standard)

tlrl-pglps

1mg




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