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Tau 和 Alpha突触核蛋白共聚集体原纤维

2023-07-13
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Tau 和 Alpha突触核蛋白共聚集体原纤维


Tau 和 Alpha突触核蛋白共聚集体原纤维

SPR-494,重组人Tau-352 (胚

胎 0N3R) 和 Alpha 突触核蛋白

共聚集体原纤维

• StressMarq的共聚集体原纤维

是用两种蛋白的单体共同孵育

形成的原纤维

• Tau 和 Asyn蛋白存在于同一条

纤维上

Tau 和 Alpha突触核蛋白共聚集体原纤维

Tau-352 (胚胎 0N3R) 和

Alpha 突触核蛋白共聚集体

原纤维(SPR-494)既可以

聚集Asyn单体也可以聚集

Asyn和Tau 蛋白单体的混合

• Tau蛋白单体也可以被聚集,

但是ThT信号不明显

Tau 和 Alpha突触核蛋白共聚集体原纤维

SPR-495,重组人Tau-441

(2N4R) 和 Alpha 突触核蛋白共

聚集体原纤维

• StressMarq的共聚集体原纤维

是用两种蛋白的单体共同孵育

形成的原纤维

• Tau 和 Asyn蛋白存在于同一条

纤维上

Tau 和 Alpha突触核蛋白共聚集体原纤维

Tau-441 (2N4R) 和 Alpha 突

触核蛋白共聚集体原纤维

(SPR-495)既可以聚集

Asyn单体也可以聚集Asyn和

Tau 蛋白单体的混合物

• Tau蛋白单体也可以被聚集,

但是ThT信号不明显

Tau 和 Alpha突触核蛋白共聚集体原纤维

Tau & Alpha 突触核蛋白共聚集体原纤维

的免疫电镜图。6nm 胶体金信号来自α突

触核蛋白,12nm 胶体金信号来自tau蛋

白。可看到两种信号同时出现在SPR-494

和SPR-495的单条纤维上。而对照组不会

同时出现两种信号。

实验方法:原纤维被吸附到碳涂层铜网格上。网格用含1% BSA 和 0.1% Tween-20 的PBS 封闭,洗涤,然后依次在封闭缓冲液中用 20 µg/mL 的一抗孵育,洗涤,再在封闭缓冲液中用 20 µg/mL 的二抗孵育,洗涤并用2% 乙酸双氧铀作为负染色。 6nm(asyn)和 12nm(tau)信号同时出现在共聚集体原纤维样品的同一原纤维链中,并且在对照 α- 突触核蛋白或 tau 原纤维中未观察到抗体交叉反应。一抗:小鼠抗人asyn单克隆抗体(StressMarq SMC-532)和兔抗人tau多克隆抗体(StressMarq SPC-802);二抗:6nm 胶体金标记的山羊抗小鼠抗体 (Jackson ImmunoResearch 115-195-146) 和 12nm胶体金标记的山羊抗兔抗体 (Jackson ImmunoResearch 115-195-146)。



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