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胶原抗体诱导小鼠关节炎模型之CAIA实验方案

2023-06-29
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PROTOCOL TO INDUCE CAIA

CAIA实验方案


Chondrex公司建议尾静脉注射单克隆抗体合剂。对于易感品系,可采用腹腔注射,但是通过腹腔注射CAIA诱发的炎症严重程度往往较低,关节炎持续时间也较短。请根据实验目的选择合适的实验方案。

Catalog NumberAmount
53100100mg
5304040mg
53010


A. Inducing CAIA without LPS

胶原抗体诱导的关节炎


在易感品系DBA/1和Balb/c小鼠中采用CAIA建立关节炎模型,根据动物供应商,动物周龄和体积大小的不同,每只小鼠需注射6-10mg单克隆抗体合剂。例如,初次注射免疫5mg抗体合剂后24小时再次注射5mg抗体合剂。关节炎会在二次免疫后的24-48小时后发生。研究员需要根据实验目的调整实验方案。


B. Inducing CAIA with LPS 

胶原抗体联用LPS诱导的关节炎


细菌毒素LPS(B细胞分裂素), MAM(支原体产生的T细胞分裂素)或SEB(金黄色葡萄球菌产生的T 细胞分裂素)和胶原抗体在诱发关节炎中具有协同效应。在这些毒素的存在下,诱导关节炎的抗体合剂的量可降低。例如,每只小鼠初次免疫注射1.5mg抗体合剂后第三天注射25-50µgLPS,对于易感品系小鼠(Balb/c, DBA/1,B10.RIII, and C.B-17 scid/scid mice),关节炎的发生率高达100%。在C57BL/6小鼠尾部静脉注射5mg抗体合剂,关节炎在初次免疫后第7-10天达到最严重, 可维持两周。在初次免疫第10或14天注射25-50µgLPS, 关节炎会持续恶化。尽管三周后炎症反应有所缓解,关节破坏是永久性的,甚至导致关节强直。


EVALUATING ARTHRITIS

关节炎评估


关节炎可通过临床评分来定性评估或用测厚仪来测量爪子厚度来评估。由于小鼠的爪子太小,因此无法像测量大鼠爪子体积那样通过浸没法测定小鼠爪子体积。

Chondrex公司提供以下评分系统(表二)


表二 关节炎炎症程度的临床评分

得分发病情况
0Normal 正常
1Mild, but definite redness and swelling of the ankle or wrist, or apparent redness and swelling limited to individual digits, regardless of the number of affected digits 

轻度的、踝关节、腕关节发红、肿胀

2Moderate redness and swelling of ankle or wrist 踝关节或腕关节中度发红肿胀
3Severe redness and swelling of the entire paw

including digits

爪子严重发红、肿胀,包括指端

4Maximally inflamed limb involving multiple joints 四肢最大程度发炎,包括多关节


表三 成功阻断单克隆抗体诱发的关节炎的药物

胶原抗体诱导小鼠关节炎模型之CAIA实验方案



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