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什么是CUT&Tag技术?

2023-03-29
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近年基因组学和表观遗传学领域引入了两种新方法:

核酸酶靶向切割和释放技术(CUT&RUN)

靶向剪切及转座酶技术(CUT&Tag)

什么是CUT&Tag技术?


CUT&RUN和CUT&Tag检测法正在取代ChIP-seq

简化的工作流程跳过了ChIP-seq实验法中的挑战性步骤,包括染色质片段化和抗体pull down,用更少的细胞和测序读数得到更佳的数据。

具体变现为:

1.低细胞需求量;

2.高吞吐量;

3.操作流程更简易;

4.低成本,测序读取次数更少;

5.数据质量可靠,重复性好


EpiCypher CUT&Tag:

孵育结合好特异性抗体与靶标蛋白后,加入蛋白 A、蛋白G与Tn5的复合物(pAG-Tn5),使得转座体进入细胞并与抗体结合,间接地固定在靶蛋白上;激活Tn5酶的切割活性,将靶蛋白结合的DNA区域切断,从而达到提取DNA、进行PCR扩增、构建文库的目的。在Tn5上融合了protein A/G抗体结合功能域的转座体pAG-Tn5是关键的进步,因为这一步允许研究者不必碎裂染色质以及进行传统的库准备步骤。



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