PlasmoTest™
细胞比色分析法
• 灵敏：培养上清液中检测限 5.10^2- 5.10^5 cfu/ml
• 可靠：无假阳性
• 快速：操作时间<1小时。过夜培养后可见结果
• 简单：使用细胞培养上清液进行比色检测
PlasmoTestTM 在细胞培养中的灵敏度
支原体物种 灵敏度 (cfu/ml)
Acholeplasma laidlawii 2.5 x 10^3
Mycoplasma arginini 2 x 10^3
Mycoplasma fermentans 5 x 10^2
Mycoplasma hominis 6 x 10^3
Mycoplasma hyorhinis 7 x 10^2
Mycoplasma orale 5 x 10^5
Mycoplasma salivarium 1 x 10^4
InvivoGen拥有专利的HEK-BlueTM-2细胞，稳定表达人源 TLR2（支原体脂肽的主要传感器）以及一个NF-κB诱导的SEAP（分泌型胚胎碱性磷酸酶）报告基因。HEK-BlueTM-2细胞可直接在HEK-BlueTM检测培养基中培养，便于检测，是常规检测的理想选择。向这些细胞中简单地添加测试样品可以得到比色结果，其灵敏度与基于生物化学发光的分析法相近。培养上清液样品中SEAP报告基因的活性可使用分光光度计在620-655 nm下测量。吸光度与污染物的量成正比。
使用PlasmoTest™的5大原因
1.PlasmoTestTM能检测所有引起细胞培养污染的支原体物种。
2.PlasmoTestTM的阳性结果（没有假阳性）能显示细胞培养受到支原体或细菌的污染（见常见问题解答）。
3.检测方法可在96孔板上进行，方便管理多个细胞系的实验室进行常规检测。
4.只需要购买此试剂盒一次，HEK-BlueTM-2细胞制备冻存可供以后使用。其他试剂能分开购买补充。
5.产品包括一本实验程序指南及疑难排解部分。
常用支原体检测方法
| 检测方法 | 数据读出 | 主要缺点
|
MycoFluor™ Mycoplasma Detection Kit | 荧光 | -苛求的载玻片制备 -坏死/凋亡细胞和细菌， 以及细胞碎片产生假阳性 -低灵敏度 |
| LookOut Mycoplasma PCR Detection Kit | PCR | - PCR可能受到抑制 （假阴性） -只提供有限支原体 物种的引物 |
| MycoAlert™ Mycoplasma Detection Kit | 生物发光 | -需要光度计 -不包括阳性和阴性 对照组 |
| MycoProbe® Mycoplasma Detection Assay | 基于DNA的 ELISA | -多步骤（ELISA） -非特异性结合风险 （假阳性） -必须避免RNase污染 |
如何保持细胞培养无支原体污染?
常见问题
问： PlasmoTest™是否只检测活支原体？
答： PlasmoTest™检测支原体脂蛋白的存留，因此能够检测细胞培养中活的和死的支原体。
问： PlasmoTest™能否检测生物试剂如培养基或胎牛血清中支原体的存在？
答： 可以，检测灵敏度在培养基中为 10^3 cfu/ml 。在胎牛血清中为 10^4 cfu/ml 。
问： PlasmoTest™能否检测细胞培养物中的细菌？
答： PlasmoTest™的原理基于TLR2的激活,因此可以同时检测支原体和细菌污染物。而且相对于肉眼无法检测的支原体，细菌污染会导致细胞培养明显改变。
细菌生长可以导致pH值降低（培养液变为黄色）和培养液变浑浊。
问： 有没有一个最佳的波长来读取样品？
答： 620 nm到655 nm之间的任何波长都适合。
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