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StarBright染料--星光高亮抗体 助力多色方案

2022-11-18
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星光染料是一种独特的荧光纳米粒子,将它与 Bio-Rad 高度验证的抗体结合,专为流式细胞术开发,为您提供卓越染色效果。星光染料使稀有群体和低密度抗原易于分辨,同时保持适用于任何多色实验的灵活性。

本篇将帮助你了解高亮星光染料如何助力流式细胞术实验。


优势:

不仅,且发射波谱

,无需特殊染色溶液

,批间重现性好

,溶液兼容性好

,与所有仪器和抗体可共用


第一批上市染料

StarBright Blue

StarBright染料--星光高亮抗体 助力多色方案

StarBright Violet

StarBright染料--星光高亮抗体 助力多色方案

明亮,溢漏减少

星光染料具有优化的激发和发射特性,并具有优越的亮度。它可以更好地分辨特定细胞群,包括稀有和低密度抗原,同时最大限度地减少荧光溢漏,更大程度地避免染料在多色方案中扩散现象。用星光染料,你可以轻松地建立更大的实验方案。

StarBright染料--星光高亮抗体 助力多色方案

图1. 和同类染料相比,星光染料改进了亮度和荧光溢漏。A, 和其它两个染料相比,SBB700(粉红色)在640nm只是非常有限的被激发。B, 人外周血在含1%BSA的PBS溶液中用CD4 AMO (Cat.#MCA1267AMO)、CD4 Brilliant Violet 510和CD4 StarBright Violet 515(#MCA1267SBV515)分别染色,所有数据在ZE5流式细胞分析仪上采集。直方图显示了这些抗体的亮度,图片右侧显示了这三种染料的染色指数。


很容易融入到你现有的实验

它们与大多数染色方案兼容,几乎可以在任何缓冲液中工作,包括商用聚合物染色缓冲液,它们的性能不会有损失(图 2)。它们可以与其他星光染料、有机荧光染料、基于蛋白质的荧光染料和其他聚合物染料结合,而不需要特殊染色方案(图 2C),使您可以轻松构建更大的多色实验方案。

StarBright染料--星光高亮抗体 助力多色方案StarBright染料--星光高亮抗体 助力多色方案
StarBright染料--星光高亮抗体 助力多色方案

图2. 缓冲溶液的兼容性。人外周血分别在含有BSA、EDTA和NaN3的缓冲液中,A, 用CD4 Pacific Blue和CD4 SBV440染色,B, 用CD4 BV510和CD4 SBV515染色,星光染料的性能均没有下降。C, 人外周血在含1%BSA的PBS溶液中用CD3 A488 (#MCA463A488), CD19 SBB700 (#MCA1940SBB700), CD4 SBV515 (#MCA1267SBV515), CD8 SBV440 (#MCA1226SBV440), CD127 A647 (#HCA145A647), and CD25 PE (#MCA2127PE)染色,所有数据在ZE5流式细胞分析仪上采集。与其他基于聚合物的染料不同,组合多种星光染料不需要特殊的染色缓冲液。


与所有流式细胞仪兼容

StarBright 染料在 ZE5 流式细胞分析仪上开发出来,可以用于任何带有合适激光器和滤光片的流式细胞仪,包括流式细胞分选仪。此外,它们也已经被用在光谱流式细胞仪上。

StarBright染料--星光高亮抗体 助力多色方案

StarBright染料--星光高亮抗体 助力多色方案

StarBright染料--星光高亮抗体 助力多色方案

图 3. 仪器兼容性。人外周血在含 1%BSA 的 PBS 中,用 CD8 SBV610(#MCA1226SBV610)、CD4 SBV515(#MCA1267SBV515)、CD127 A647(#HCA145A647)和 CD25 SBV440(#MCA2127SBV440)4℃染色 30 分钟。使用 A, 常规流式细胞仪和 B, 光谱流式细胞仪获得了

类似的 Treg( CD4+、CD25+、CD127lo)结果。C, 光谱流式上,人外周血用 CD4BV605 和 CD8SBV610(MCA1226SBV610)染色,易于识别。


批间重现性好

与某些聚合物和其他染料不同,星光染料可以具有很高的批间重现性(图 4),稳定,耐光漂白,不会随着时间的推移而损失性能。它们还表现出较少的交叉激光激发,不会像串联染料一样只受主体染料激发。此外,它们可以固定在多聚甲醛中,荧光几乎没有下降。


表1.批间重现性

批次染色指数靶细胞群
SBV515-1

213.5

210.0

203.4

72.9%

70.7%

70.7%

SBV515-2

253.2

245.1

258.5

72.8%

72.7%

72.1%

SBV515-3

222.4

204.8

193.6

71.9%

70.5%

69.8%

平均值222.771.6%
偏差23.710.01
StarBright染料--星光高亮抗体 助力多色方案

图4. 星光染料的批间重现性。用三批CD4 

SBV515(MCA1267SBV515)对人外周血进行

染色,以评估染色指数的差异和各批CD4阳性

率。表中所示的重叠(实线)、实际染色指数

和阳性百分比数据的变化都是最小。


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