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单克隆抗体与多克隆抗体的区别

2022-08-15
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单克隆抗体和多克隆抗体,虽然只有一字之差,但是两者的区别,还是比较大的,本篇欣欣就为各位科研的老师们整理单克隆抗体与多克隆抗体的区别,供大家参考使用。


单克隆抗体


特点:


不易产生批次间差异。

仅由一种抗体亚型组成(例如 IgG1、IgG2、IgG3)。如需使用二抗进行检测,应针对正确的亚类选择抗体。


抗体制备:


技术要求较高。

应用技术之前需接受专门培训。

需要花费较长时间制备杂交瘤细胞。


优点:


制得的杂交瘤细胞为持续且可再生产的单克隆抗体来源,而且所有批次均相同,有助于提升实验过程和实验结果的一致性和标准化水平。


单克隆抗体只检测每个抗原上的一个表位,因此具有以下优点:


切片和细胞染色产生的背景信号更少。特异性地检测一个靶表位,不易与其它蛋白质发生交叉反应。

由于具有高特异性,单克隆抗体非常适于用作实验中的一抗,其产生的背景染色信号通常显著低于多克隆抗体。

相较于多克隆抗体,单克隆抗体的同质性非常高。在相同的实验条件下,单克隆抗体实验之间的结果重现性非常高。

得益于其高特异性,单克隆抗体能够在相关分子的混合物中(例如在亲和纯化过程中)极为高效地结合抗原。


缺点:


特异性过高,以致于无法进行跨物种的检测。

与多克隆抗体相比,更易受化学处理造成的抗原表位丢失的影响。这可通过合并靶抗原相同的两种或多种单克隆抗体进行补偿(例如使用抗体组合试剂盒)。



多克隆抗体


特点:


识别任一抗原上的多个表位。所得血清为异质性抗体混合物,其亲和力各有不同。

多克隆抗体主要由 IgG 亚类组成。

通常使用多肽免疫原制备以独有表位为靶标的多克隆抗体,尤其是针对高同源性的蛋白家族。



抗体制备:


制备成本低廉且制备速度较快。

制备过程比单克隆抗体简单。


优点:


多克隆抗体可识别任一抗原上的多个表位,因此具有以下优点:


高亲和性:由于靶蛋白上的多个表位能够结合不止一个抗体分子,多克隆抗体可放大低表达水平靶蛋白的信号。但是,这会影响定量实验(如流式细胞术实验)结果的准确性。

可识别多个表位,有利于免疫沉淀 (IP) 和染色质免疫沉淀 (ChIP) 实验获得更好的结果。

与单克隆抗体相比,对微小抗原变化(例如多态性、糖基化异质性或者轻微变性)的包容性更强。

可识别与免疫原蛋白质具有高度同源性的蛋白质,还可用于筛查非免疫原物种的靶蛋白。

通常是检测变性蛋白质的首选。

多表位通常可提升检测的稳定性。


缺点:


易产生批次间差异。

产生大量非特异性抗体,可能会在某些应用中产生背景信号。

由于具有多个表位,检测免疫原序列的交叉反应性非常重要。

不适用于探测抗原的特定结构域,因为抗血清通常会识别多个结构域。


单克隆与多克隆抗体的主要区别总结:


单克隆抗体
多克隆抗体
制备成本高昂制备成本低廉
应用技术之前需接受专门培训制备技能要求不高
需要较长的时间制备杂交瘤细胞制备速度较快
产生大量特异性抗体产生大量非特异性抗体
仅识别一个抗原上的单一表位识别任一抗原上的多个表位
制得的杂交瘤细胞为持续且可再生产的单克隆抗体来源批次间可能存在差异
批次间无差异或差异较小-


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