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分享细胞周期检测五个小知识点

2022-08-10
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细胞周期检测五个小知识点汇总整理:


1、流式细胞术分析细胞周期的原理


在细胞周期的不同时期,DNA含量存在差异,用DNA染料进行染色(如应用最广泛的染料PI),DNA含量多,荧光强度高,DNA含量少,荧光强度低,因此可以根据DNA荧光强度的变化,来判断细胞处于哪个时期。

分享细胞周期检测五个小知识点


2、利用PI分析细胞周期,需要加入RNase消除RNA的影响


PI是通过插入双螺旋结构中叠加在一起的碱基对核酸进行染色的,并且它可以插入所有DNA和RNA的双链区,PI不是DNA特异性的,所以需要加入RNase消除RNA的影响。


3、细胞周期检测时,一定不要洗涤


不同于蛋白染料和细胞之间的牢固结合,DNA与染料的结合是一种结合态和游离态之间松散的平衡,不是很牢固,所以洗涤步骤会造成染料丢失,降低核酸的特异性荧光,造成测量值变小,因此,DNA染色时一定不要洗涤。

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4、 固定细胞和活细胞的细胞周期检测


PI、7-AAD、TOTO-3和YOYO-1等染料不能透过完整的细胞膜,在染色时,一般需要用70%乙醇固定、通透细胞膜,从而使这些染料进入细胞核内与DNA结合,所以市面上很多的细胞周期检测试剂盒都是需要固定细胞的;如果想要检测活细胞样本,可以咨询我们在线客服人员。


5、其他应该注意的问题


• 仪器:定期清洗喷嘴,激光预热时间充分,低流速进样等。


• 样本:消化要充分,但不能过度,保证细胞不粘连、不破裂,染色要充分等。



如需了解相关的检测细胞周期的产品,请联系欣博盛在线客服


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