什么是类风湿因子(rheumatoid factor)?
RF(类风湿因子)是许多不同抗体的可变混合物;这些抗体中有些结合其他抗体,有些是自身抗体(结合自身抗原的抗体)。
什么是嗜异性抗体?(heterophilic antibodies)
嗜异性抗体可以结合其他抗体。在人类样本中,这些抗体或者是结合人类免疫球蛋白的自身抗体,或者是人类抗动物免疫球蛋白抗体(HAIA),包括人类抗小鼠抗体(HAMA)。
类风湿因子和嗜异性抗体如何使ELISA结果不准确?
在夹心法ELISA中,匹配的抗体对用于捕获和检测可溶性分析物。当样品中存在分析物时,正常情况可以测量到阳性信号(如图1A所示)。然而,血清和血浆中的干扰因素,如类风湿因子(RF)和嗜异性抗体,会使检测的capture和detection抗体交联,从而导致假阳性信号和不准确的分析物定量(如图1B所示)。交联使得无法区分特异性和非特异性信号,最终导致结果不可靠。如果要消除干扰,通常需要加入额外的样品预处理步骤,例如通过PEG 6000沉淀或免疫球蛋白阻断去除抗体。
为了有效消除类风湿因子和嗜异性抗体所造成的假阳性信号,提高分析结果的可信度,Mabtech推出ELISA PathRF kits,在这种ELISA形式中,detection抗体采用重组的单克隆抗体,并加入专门的RF-block diluent,避免了干扰的风险。(如图1C所示)
Mabtech的ELISA PathRF试剂盒已通过含RF血浆的验证
使用一组不匹配的抗体来确定ELISA中获得的信号是真信号还是假阳性信号。这样一组不匹配的抗体由与完全不同的蛋白质结合的capture和detection抗体组成。这种不匹配的设置不能产生真实的信号。然而,如果获得了信号,这表明样品中的RF因子交联了capture和detection抗体,产生了假阳性信号。
在来自类风湿性关节炎患者的100份血浆样品中,Mabtech使用不匹配的ELISA抗体组观察到高频率的假阳性结果。相比之下,ELISA PathRF没有产生假阳性信号(图2)。
图2. Rheumatoid arthritis患者(n=100)的血浆在不匹配的ELISA(针对不同靶标的不匹配抗体组)或不匹配的ELISA PathRF中进行测量。
订购详情
货号 | 名称 | 规格 | 检测范围 |
3420-1HP-DP-1 | ELISA PathRF: Human IFN-γ | 1 plate | 1-1000 pg/ml |
3416-1HP-DP-1 | ELISA PathRF: Human IL-1β | 1 plate | 1-316 pg/ml |
3460-1HP-DP-1 | ELISA PathRF: Human IL-6 | 1 plate | 10-3160 pg/ml |
3560-1HP-DP-1 | ELISA PathRF: Human IL-8 | 1 plate | 3.16-1000 pg/ml |
3430-1HP-DP-1 | ELISA PathRF: Human IL-10 | 1 plate | 3.16-1000 pg/ml |
3520-1HP-DP-1 | ELISA PathRF: Human IL-17A | 1 plate | 3.16-1000 pg/ml |
3512-1HP-DP-1 | ELISA PathRF: Human TNF-α | 1 plate | 3.16-1000 pg/ml |
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