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如何在五分钟之内选择一款合适的ELISA试剂盒?

2022-07-28
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很多科研的老师在做ELISA实验时,往往对怎么选择一款合适的ELISA试剂盒感到困惑,比如说我应该选择什么指标的?应该选择什么种属标本的?怎么选择灵敏度/标曲这些?今天,小欣就整理了ELISA产品相关要素,助力您在五分钟之内掌握筛选一款适合自己实验的ELISA试剂盒。


ELISA产品选择要素

1.根据实验物种及待检样品性质来选择

种属:人、小鼠、大鼠、鸡、牛、猴等;

样本类型:血清、血浆、组织培养上清、组织或细胞裂解物。

2.根据样品中检测物水平选择

宽动力学检测范围:对样品种待测物水平没有任何参考数据;

高灵敏度试剂盒:待检物含量很低。

3.根据样本可获得性来选择


通常商品化试剂盒的样品用量在50ul或100ul,也有部分用量可以少至20ul。


1.供应商资质评估

同行口碑、文献引用、品牌历史。


2.试剂盒关键技术参数

加标回收率、精密度、灵敏度等。


当然传说中的八大质控指标,也是一项可供参考的内容。

欣博盛生物的每款试剂盒,都会附带随货说明书,可助大家更详细的了解该产品的情况,并且我们公司也有专门的技术同事可协助解决技术上的难题,实验室的老师也会对大家的实验问题进行解惑。如果大家购买了我们欣博盛ELISA试剂盒,有任何疑问,都可以联系我们把问题给解决掉。


1.回收率

将已知的低、中、高浓度的重组蛋白掺入到待测样本中,掺入前后测到的浓度增加部分与掺入浓度之比就是回收率,以此验证检测的准确度。复杂的样本基质,如血清、血浆中可能含有干扰因子,影响准确定量目标分析物。优秀的ELISA试剂盒回收率通常在80-120%之间(视为无可计量的基质干扰),合格试剂盒在60%左右。


2.稀释线性

样本稀释后,最终分析物浓度应该相同,这个就是公认的实验线性。干扰因子会影响实验的线性,除非在研发环节克服这些干扰效应。我们为每个验证过的样本类型用试剂自带的稀释液进行系列稀释。结果用检测值和理论值的百分比表示,线性介于80-120%为理想结果。


3.精密度

在相同条件下,对被测量物(高、中、低浓度)进行多次反复测量,测得值之间的一致(符合)程度。这一特性具有重要意义:


保证一项试验中得到的结果是准确的,并且一次实验到下一次实验结果可重复;

判定两个结果相同还是不同。

通常用变异系数(coefficient of variation, CV)来表示。优秀ELISA试剂盒的酶标板内变异系数(CV)小于5%,酶标板间变异系数小于8%。


4.校准

每个试剂盒包含的标准品都经过高纯度蛋白的校准。标准品质量是通过与母校准品进行比较而制定。用于保证不同批次间试剂盒的一致性,所有批次的试剂盒均经过母校准品校对,不会出现结果偏差。


5.特异性

抗体是特异的,只与相应抗原反应。实际制备的抗体却常有非特异性反应,这是因为抗原不纯造成的。多组分抗原之间存在共同的抗原决定簇,或者两个抗原决定簇结构类似能与同一抗体结合,均可出现抗体与异源抗原的交叉反应。


ELISA试剂盒包含的试剂(见产品说明书或随货说明书)


以小鼠白介6试剂盒为例(Mouse IL-6 ELISA),我们试剂盒主要组成部分分别是:抗体预包被酶标板、冻干标准品、标准品&标本通用稀释液、浓缩生物素化抗体、浓缩酶结合物、酶结合物稀释液、浓缩洗涤液、显色底物、反应终止液、封板胶纸、产品说明书等十二个成分。


看完本文,如果大家对于怎么选择一款合适的ELISA试剂盒还有疑问的话,可以咨询我们的在线客服,寻求帮助哦。


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