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转染实验总是失败? 可以试一试Mirus的TransIT-X2 Dynamic Delivery System。

2022-02-28
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细胞转染作为细胞生物学和分子生物学常用的技术手段,在实验过程中,会遇到转染效率低或者细胞毒性大,影响后续实验进行,遇到以上细胞转染实验的问题,可以试试TransIT-X2 转染试剂。TransIT-X2 Dynamic Delivery System适用于多种细胞系,且毒性小,质量稳定,可以降低转染失败的概率,并快速得到正确的实验结果。

 

  产品介绍 

TransIT-X2®Dynamic Delivery System是一种先进的非脂质体聚合系统,可以高效转染多种细胞类型,例如A549AsPC-1BHK-21BJBT-20Caco-2C2C12CFPAC-1CHO-K1DI-TNC1DU-145HEPG2HCC1143HCC38HEK293HMEC(epithelial)HUVECFreeStyleTM293-FMDCKNHDFNIH-3T3L929LNCaPPC-12RAW 264.7T47DAU565BxPC-3COS-7HelaHCT 116MCF-7MDA-MB-231PC-3等。TransIT-X2可用于DNAsiRNA等转染。TransIT-X2转染不需要培养基改变,可以在含血清的培养基中进行。

 

  产品特性   

● 在广泛的细胞类型中具有优良性能

● 适用于多种应用

● 高效传递质粒DNAsiRNA/miRNACRISPR/Cas9组分

● TransIT-X2®系统可在多种细胞类型中实现卓越的基因表达

  

  Mirus TransIT-X2®转染试剂常见包装  

MIR 6003

TransIT-X2® Tranfection Reagent 

TransIT-X2®转染试剂

1 × 0.3ml

MIR 6004

TransIT-X2® Tranfection Reagent

TransIT-X2®转染试剂

1 × 0.75ml

MIR 6000

TransIT-X2® Tranfection Reagent

TransIT-X2®转染试剂

1 × 1.5ml

MIR 6005

TransIT-X2® Tranfection Reagent

TransIT-X2®转染试剂

5 × 1.5 ml

MIR 6006

TransIT-X2® Tranfection Reagent

TransIT-X2®转染试剂

10 × 1.5 ml

  

  Mirus TransIT-X2®转染试剂转染试剂数据和文献  

(1)使用TransIT-X2®Dynamic Delivery System在多细胞系和原代细胞中高效转染GFP

采用TransIT-X2®Dynamic Delivery System转染EGFP质粒DNAA549CHO-K1Hep G2MDCKLNCaPPC-12、原代人乳腺上皮细胞(HMEC)和正常人真皮成纤维细胞(NHDF)。在96孔板上用0.2-0.4µlTransIT-X2®转染0.1µgDNA(试剂与DNA的比例2:13:14:1)。使用Guava® easyCyte™ 5HT流式细胞仪检测三次转染48小时后的每个孔。


MIR 6000   转染实验总是失败? 可以试一试Mirus的TransIT-X2 Dynamic Delivery System

 

 (2)使用TransIT-X2®Dynamic Delivery System可视化高GFP表达

采用TransIT-X2®Dynamic Delivery System将编码EGFP的质粒DNA转染到A549CHO-K1HepG2LNCaPMDCKPC12、原代人乳腺上皮细胞(HMEC)和正常人真皮成纤维细胞(NHDF)转染在35mm MatTek培养皿中进行,使用4-8µlTransIT-X2®传递2µgDNA。转染48小时后,使用Zeiss Axiovert S100倒置荧光显微镜捕捉图像(32X)


MIR 6000   转染实验总是失败? 可以试一试Mirus的TransIT-X2 Dynamic Delivery System  


(3)TransIT-X2®Dynamic Delivery System优于Lipofectamine®试剂。

A549 (A)MDCK (B)细胞用荧光素酶编码质粒DNA转染,使用TransIT-X2®(Mirus Bio)Lipofectamine®2000 (Thermo Fisher Scientific)Lipofectamine®3000 (Thermo Fisher Scientific),在指定的试剂-DNA比率或试剂- p3000™- DNA比率下转染24小时。转染通过荧光素酶活性测定。细胞毒性是通过定量从受损细胞的细胞质中释放的LDH来评估的。与Lipofectamine®2000Lipofectamine®3000的细胞相比,在最佳比例下转染Trans - x2®的细胞中可以观察到更高的转基因表达和更低的细胞毒性。


MIR 6000   转染实验总是失败? 可以试一试Mirus的TransIT-X2 Dynamic Delivery System 


(4)TransIT-X2®Dynamic Delivery SystemLipofectamine®2000获得更高的击倒率。

TransIT-X2®Dynamic Delivery SystemLipofectamine®2000转染试剂被用于转染靶向内源性蛋白质- GAPDHAHA1siRNA,或在正常人类真皮成纤维细胞(NHDF)中传递非靶向siRNA控制。根据每个制造商的协议,用4µlTrans IT-X2®6µlLipofectamine®200025 nMsiRNA转染在6孔板上细胞。使用qRT-PCR相对于18s rRNA水平测量GAPDHAHA1 mRNA的量,然后在转染后48小时归一化至非靶向对照组的mRNA水平。误差条表示三次的标准差。

 

MIR 6000   转染实验总是失败? 可以试一试Mirus的TransIT-X2 Dynamic Delivery System


  转染实验操作流程  

转染流程包括培养细胞,制备TransIT-X2®试剂和DNA复合物,将复合物添加到完全生长培养基中的细胞中,具体操作流程和相关问题解决方案可参考说明书。(https://www.mirusbio.com/products/transfection/transit-x2-dynamic-delivery-system#product:MIR%206000




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