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Elispot的优质供应商——Mabtech

2021-05-12
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酶联免疫斑点检测(Enzyme-Linked Immunospot Assay, Elispot)结合了Elisa技术和细胞培养技术,在单细胞水平监测细胞因子的分泌情况。其原理是用Elispot板上捕获抗体特异性结合细胞所分泌的因子,然后用斑点的形式呈现出来的一种方法。MabtechElispot在全球的质量和性价比屈指可数。

 

1.酶联免疫斑点检测方法有如下优点:

1.1 灵敏度高,可以达到1/1000000,是非常灵敏的检测手段。比传统elisa要高23个数量级。

1.2 适合用于高通量筛选。分离的细胞不需要进行体外扩增,实验人员能够在同一次实验进行多块板的操作。

1.3 单细胞水平的检测,Elispot的技术能够检测到单个细胞分泌细胞因子的情况。

 

实验步骤: 

2.1 MabtechElispot是在底物有pvdf膜的96孔板上实验。

分为两种板,一种需要客户自己包板的basic系列,另一种是已经包被好捕获抗体的proplus系列。

2. 2 mabtechelispot的板上加入细胞和各种刺激物共培养。在抗原特异性或者非特异性有丝分裂的影响下,数小时内,细胞就可以分泌各种细胞因子。

2.3 分泌的细胞因子能够被板上的包被抗体捕获,洗去板上的细胞。

2.4 加入生物素化的检测抗体能够和特异性的分泌因子结合。

2.5 Mabtech能够提供两种显色系统,HRPALP。针对hrp显色体系,加入辣根过氧化物标记的链霉亲和素。针对ALP显色体系,加入碱性磷酸酶标记的链霉亲和素。

两者的区别在于,ALP显色时间较长,但是斑点持久,实验完成后,斑点可以一直保存在膜上,随时可以观察。HRP系统显色时间较短,但是斑点在膜上很快会褪色,不利于长期保存。Mabtech建议客户可以选择ALP显色系统。

其原理见图1

Elispot的优质供应商——Mabtech

 


1 ELISPOT流程示意图

2.6 每一个斑点都对应一个分泌该因子的细胞,通过Elispot读板仪计算每孔中的斑点数。Mabtech最新推出的的IRIS,与其他品牌的酶联斑点仪器相比,

 

IRIS具有如下优点:

2.6.1 操作简便,客户经过1-2个小时培训,能够熟练操作系统。

2.6.2 通过构建数学模型对每个点进行计算,使计数更加客观。

2.6.4 IRIS还能够用于荧光酶联斑点实验(fluorospot)结果的检测,且目前最多能够进行4种荧光的分析。基于对每个点3d立体分析,能够准确定位每个斑点的中心,有效计入每个实际的斑点,去掉非特异性斑点。


3. Elispot的应用和热销产品

3.1. 疫苗研发 很多疫苗研发的客户会选择酶联免疫斑点实验(Elispot)进行细胞情况的分析,比较热销的产品时人的IFN gammail-2igG等指标。

供应商

产品编号

产品名称

Mabtech

3420-2APT-10

Human IFN-gamma ELISpotPRO (ALP)

Mabtech

3445-4APW-10

Human IL-2 ELISpotPLUS (ALP)

Mabtech

3850-2H

Human IgG ELISpotBASIC (HRP)


3.2. 细胞治疗领域 通过Elispot试剂盒能够灵敏地监测免疫反应。主要的热销指标有:human IFN-gamma, Granzyme B,或者是TNF-alphaIL-12/23等指标。


供应商

产品编号

产品名称

Mabtech

3485-4APW-2

Human Granzyme B ELISpotPLUS (ALP)

Mabtech

3512-4APW-10

Human TNF-alpha ELISpotPLUS (ALP)

Mabtech

3450-4APW-2

Human IL-12/-23 (p40) ELISpotPLUS (ALP)


4. 当然如果有Flurospot可以一起检测以上几个指标,实验变得更加的简单和快速。Fluorospot还有其他的应用。

4.1 抗体亚型鉴定 Mabtech新推出的小鼠抗体亚型鉴定试剂盒,基于Elispot,快速鉴定IgG亚型。


供应商

产品编号

产品名称

Mabtech

FS-53515756-2

Mouse IgG subclass FluoroSpot



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